核酸试剂种类繁多，判断其是否有毒需要综合多方面因素考虑，以下是一些常见的区分方法：从成分角度 查看试剂主要成分：许多核酸试剂的基本成分本身大多是无毒的。例如，常见的用于核酸提取的试剂成分如 Tris-HCl（三羟甲基氨基甲烷盐酸盐）、EDTA（乙二胺四乙酸）、NaCl（氯化钠）等缓冲液成分，在正常使用浓度下通常是无毒的。但如果大量误食或接触不当，可能会引起一些不适，比如高浓度的 NaCl 可能导致口腔或皮肤的刺激感。 关注特殊添

水平凝胶电泳是分子生物学实验中常用的技术，在实际操作过程中可能会遇到以下一些常见问题： 电泳结果不理想 条带模糊 原因：可能是样品本身含有杂质，如蛋白质未除净，在电泳过程中与核酸一起移动，干扰条带形成；电泳缓冲液使用次数过多，离子强度改变、pH 值发生变化，影响核酸的迁移速率和聚焦效果；加样量过多，导致条带在电泳过程中扩散变宽、模糊不清。 解决方法：对样品进行更充分的纯化处理，如增加蛋白质抽提、沉淀等步骤

在现代生物技术领域，PCR（聚合酶链式反应）技术无疑是一项具有革命性意义的重要发明。它能够在短时间内大量扩增特定的 DNA 片段，为众多生物研究和应用提供了基础。而在生物 PCR 分离过程中，磁力架正发挥着不可或缺的关键作用。 一、磁力架在生物 PCR 分离中的重要性 PCR 反应完成后，往往需要对反应产物进行分离和纯化，以获取高质量的目标 DNA 或 RNA 等生物分子，便于后续的分析、测序、克隆等操作。磁力架的出现，极大地简化和加速了这

看不懂啊看不懂，大专生自学，想问问在看这个之前是不是把生物化学看了会更容易懂一些？

酪胺染料的标记，可能会遇到的问题： 1.非特异性染色：酪胺染料在被HRP催化后，氧化的酪胺具有高度反应性，可能与样本中多个位置的蛋白质发生共价结合，导致背景信号增加。 建议：优化过氧化氢和酪胺的浓度，能减少非特异性染色。降低酶反应时间也有助于减少背景信号。这些都需要客户根据自己的实验进行调整，我们无法给他们一个确定的浓度去尝试。因为不同的实验，环境，操作，都会出现不同的结果。 2.过度放大导致的信号溢出：TSA是

琼脂糖凝胶电泳（Agarose Gel Electrophoresis）是一种常用于分离、鉴定和提纯 DNA 片段的电泳技术。它以琼脂或琼脂糖为介质，借助电场驱动 DNA 分子在凝胶内移动，从而实现不同大小分子的分离。琼脂糖凝胶电泳与其他支持物电泳的主要区别在于，它兼具 “分子筛” 和 “电泳” 的双重作用。 水平电泳仪 原理 琼脂糖凝胶电泳是以琼脂糖为介质，对不同大小的 DNA 或 RNA 进行分离的电泳方法。琼脂糖是一种多糖，具有亲水性且不带电荷。核酸分子属于两性

有没有大佬手碰到过核酸染剂EB啊。。好害怕，我不小心手碰到EB污染区了

一、百萤 pH荧光探针Protonex 红600参数 Ex(nm) 576 Em(nm) 597 分子量 698.94 溶 剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 二、百萤 pH荧光探针Protonex 红600概述 Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Red染料

请问能利用miRNA或者siRNA进行特异性敲除靶基因吗？ 虽然siRNA还与染色质的异染色质化有关，miRNA与抑制mRNA翻译有关，但是这俩和基因敲除，DNA水平上没啥关系吧 （纯不知道，别喷呜呜🥺）

作为转录因子本身就有DNA结合域 BD和转录激活结构域 AD吧， 那么在酵母单杂交系统中，只将编码待测转录因子cdna的表达载体导入酵母细胞，经表达产生的转录因子，不就有这两个结合域吗？ 为什么要将编码待测转录因子cdna与已知酵母转录激活结构域融合表达载体导入酵母细胞？ 我不理解的点是，编码待测转录因子cdna表达后，不就应该能具备这两个结构域吗，为何当时还要将转录激活域融合表达？

SnapGene（分子生物学工具）https://pan.quark.cn/s/4bb7d9a9ffff

凝胶电泳 DNA Marker 跑出来重影是什么原因

有个题是原核生物的负转录，这题是不是想说负转录调控，我看有的答反转录，虽然有但是一般想让答反转录，就会直接说反转录或逆转录吧，不会说负转录吧？

一、百萤活性氧Cell Meter线粒体羟基自由基检测试剂盒简介 细胞内羟基自由基的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基（HO·）是与其他分子高度反应的活性氧（ROS）之一，以实现稳定性。通常，羟基被认为是氧化代谢的有害副产物，其可以在生命系统中引起分子损伤。它显示平均寿命为10-9秒，可以与几乎所有生物分子如核DNA，线粒体DNA，蛋白质和膜脂质发生反应。 MitoROS OH580是活细胞渗透探针，可以快速和选

我想用EGFP当报告基因来筛选启动子，但是我构建好突变菌后只有一个启动子控制下有荧光产生。我本以为是其他启动子上没有核糖体结合位点（RBS）导致的，所以我给其中两个启动子后面加上了一段RBS序列再进行构建，发现EGFP还是没有产生荧光，想请教一下这是为什么？大佬求求了！帮帮孩子吧 kan启动子控制的是有荧光的，adha启动子控制的EGFP转化进我的目的菌里没有荧光，加了RBS序列后还是没有。

各位杰青，我在做EGY48体系的酵母单杂实验时，转录因子连接pb42ad载体，没有去终止密码子，会影响后续的报告蛋白表达吗？书各位杰青教教，下面是pb42ad的载体图谱。

1.什么是DiI？它的用途是什么？ 答：DiI即DiIC18（3）是常见的细胞膜荧光探针之一，全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine 。呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光。它的家族还有DiR、DiO、DiA、DiS、DiD。 2.如何区别DiI探针中的C12、C16、C18？ 答：从水溶性

一、制备感受态的菌液收集时间： 1、准确测定OD值：OD在1.2～1.5之间。 1）为了准确测定OD值，建议将菌液稀释不同浓度测定（1、2、4、8、16倍稀释，看其OD值是否呈线性关系）。每个倍数做3－5个重复，应该可以大致推断OD值是否准确！菌液看上去浑浊，但OD值不高，很可能OD稀释倍数不够！ 2） OD值是否测准也可以这样估算：OD600为40左右时，菌体湿重（6000rpm离心5min）约0.95g/10ml。高密度发酵时菌体湿重将相应下降。 （MTT方法即比色法的吸收度在0.2～0.

1.百萤活性氧(ROS)概述 活性氧(ROS)是具有化学活性的含氧分子，是作为细胞代谢的副产品自然产生的。在生理条件下，ROS水平受到仔细调节，它们在正常细胞信号转导、细胞周期、基因表达和体内平衡中充当信使。 当过量产生时，ROS有可能导致许多有害事件。在高浓度下，ROS会在细胞中诱导氧化应激，从而导致细胞大分子（如核酸、膜脂和细胞蛋白质）的后续损伤。这些生物分子的氧化损伤可引发细胞凋亡，与衰老有关，并与多种疾病、癌症和神经退

大神们帮忙看看吧 最近在构建重组质粒 采用的是同源重组的方法 载体线性化方法采用反向PCR 插入片段扩增时引物带上同源臂 1. 这是我设计的反向引物 2.这是我设计的扩增目的基因的引物 3.这是我重组后的测序结果 问题就是目的片段完全没有连接上去，而是插入了一些反向PCR 引物位置的小片段，我个人感觉应该是载体线性化过程出现了问题，但是线性化跑胶条带特异性又很好，没有杂带，如下图： 所以请问各位大神有遇到过这种情况吗，是真不知

各位大佬，帮忙给点意见吧，我的目的基因 1352bp ，Tm 值是 59，我退火温度 60 °C 能够跑出来，另外一个 1900 bp ，退火温度 54°C 能跑出来， 前一个月每次都能跑出来，最近这几天同样的体系，同样的温度同样的引物，除了模板换过，跑出来过几次，但是第二天重新做的时候就跑不出来了，我开始是怀疑模板问题，我稀释过，跑出来一次，现在也跑不出来了，回收纯化过的浓度低，我想着再扩增一次，现在也是扩增后也没有条带了，求求各位大佬给点意

大佬们求分享

无需称量研磨珠，无需几小时繁琐操作，艾德莱粪便DNA提取试剂盒。这是来自澳门大学的客户反馈，

一、百萤 活性氧ROS Brite HPF简介 活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子（如超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物）。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下，ROS产生显着增加

一、百萤 活性氧ROS Brite HPF简介 活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子（如超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物）。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下，ROS产生显着增加

今天给大家分享一例教科书式的植物microRNA提取试剂盒。有幸遇到艾德莱就可以少走点弯路，microRNA提取试剂盒，这个是好用+便宜的典范~

求教诸位前辈， 小弟的课题和X染色体失活相关，设计了X染色体上的等位基因引物，PCR产物中包含STR位点用于区分等位基因， 但扩增出的等位基因电泳峰的峰高比例经常严重偏离1:1的状态，少量样本能到7:3或8:2的情况， 样本、引物、缓冲液、dNTP、Polymerse和PCR流程温度时间等条件都验证过，但都没有解决，大量样本的等位基因峰高依然不是1:1， 所以请教诸位前辈这可能是什么问题，应该如何解决？

1.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针参数 Ex -- Em -- 分子量 N/A 溶剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 2.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针介绍 SO Green 520WS 单线态氧探针被开发为水溶性荧光探针，用于检测细胞外单线态氧，因为它不渗透细胞。它对单线态氧具有高度选择性。与其他可用的荧光和化学发光单线态氧检测试剂不同，SO Green 520WS 单线态氧探针不会对羟自由基、超氧化物或其他活性氧 (ROS) 显示任何明显的响应。该指示剂仅呈现微弱的蓝色荧光。

不知道什么原因造成了这种现象，我用FLAG-Beads拉FLAG标签蛋白钓HA标签蛋白，之前都没有出现过这种问题，这两次突然出现孵HA抗体去曝光也能看到FLAG标签的蛋白条带，这是什么原因啊？求助各位大神

请问各位有人知道emsa实验的H Buffer怎么配，好像不能单买，打算自配，感谢。 附上商品化试剂的图片，它不能单买，只能在其他产品中附带，太不划算了。

SCI的捷径，数据可用性更强！ 消除一切不可控因素，让检测数据更具有可比较性、可分析性、可统计性！ Cloue-Clone——Luminex多因子检测术和流式细胞术检测技术行业领先！ 全球最多检测指标组合！ 10几个物种，6325种指标，随心配！ 千万别问组合有多少，数不完，根本数不完！

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哔站无了 MOOC也无了 孩子找不到资源了

一、百萤 Annexin V-Cy5标记简介和工作原理 细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细

如题，有没有什么方法可以批量进行blastn比对，一条一条比太累了

谁要可dd

百萤 Annexin V-AF488标记参数： Ex(nm)：499 E m(nm)：520 分子 量：~36000 溶 剂：Water 存储条件：在零下15度以下保存，避免光照 百萤 Annexin V-AF488适用仪器 （1）流式细胞仪 激发：488nm激光 发射：530/30nm滤波片 通道：FITC通道 （2）荧光显微镜 推荐孔板：黑色透明 通 道：Pacific Blue通道 百萤 Annexin V-AF488实验方案 概述 用测试化合物（200μL/样品）制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵

请问用碱裂解法提取的质粒老是在500bp左右有一条质粒条带，是什么原因呢，该怎么解决呢？

请问用碱裂解法提取的质粒老是在500bp左右有一条质粒掉带，或10k以上有基因组，是否是裂解的时候没有要好或裂解时间问题？谢谢各位大佬

一、百萤 Annexin V-Cy3标记概述： Annexin V-Cy3标记是用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的

有没有大神帮忙看看

分析方案 概述 用测试化合物（200μL/样品）制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞： 1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl2，pH 7.4。 1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。 1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。 1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。 1.5在

百萤Annexin V-mFluor Violet 540实验方案 分析方案 概述 用测试化合物（200μL/样品）制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞： 1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl2，pH 7.4。 1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。 1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。 1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测

北京药用植物研究所，白木香，RN38提取出了白木香愈伤组织，超级满意，电泳图也非常漂亮。

1.膜联蛋白结合缓冲液（10X）简介和工作原理 膜联蛋白 V 结合缓冲液 * 10X 优化用于成像和流式细胞术* 是一种等渗缓冲液，用于促进使用膜联蛋白 V 偶联物标记凋亡细胞。 该缓冲液的 pH 值为 7.4，含有浓度的钙，可促进膜联蛋白 V 与凋亡细胞表面暴露的磷脂酰丝氨酸残基结合。 膜联蛋白 V 结合缓冲液 *10X 优化用于成像和流式细胞术* 以 10X 浓缩液形式提供。 在膜联蛋白 V 染色之前，我们建议使用蒸馏水将 10X 浓缩液稀释为 1X 工作溶液。 实验后，丢弃

这里的调节物，正调节负调节都是什么意思啊，好难。

Annexin V是一种高效的蛋白质，广泛应用于细胞生物学研究。它具有高亲和力，能够特异性地结合到外翻的磷脂酰丝氨酸（PS）上，这一现象在细胞凋亡早期阶段尤为明显。因此，Annexin V已成为检测细胞凋亡的标准工具。 荧光标记的Annexin V更是如虎添翼，通过与不同颜色的荧光染料结合，研究人员可以在流式细胞术和荧光显微镜等技术中，轻松、高效地检测和分析细胞凋亡。 Annexin V主要优点包括： 1. 高灵敏度和特异性：荧光标记的Annexin V能够准确识别