孟德尔随机化药物靶点需要做共定位分析吗，意义是

01 限制性内切核酸酶 限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶(“分子手术刀”)。 发现于原核生物体内，现已分离出100多种，几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶。例如，从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。 目前已经发现了200多种

高血压病是世界公认的心血管疾病的主要危险因素。所有心脑血管病相关死亡，约半数由高血压所致。临床上常用的抗高血压药，在降压及改善症状方面尚存在许多不足。现代医学对高血压的确切病因及发病机制尚存在许多未知，加强对高血压病因及发病机制的研究，开发出更有效的治疗药物是非常必要的。而实验研究离不开高血压动物模型，好的动物模型能够较好地模拟疾病状态，为全方位的研究提供可能。 动物的选择 常见的动物模型类别有鼠、

脊髓损伤（spinal cord injury, SCI）是一种导致死亡率和伤残率较高的疾病，能够导致不同程度的肢体瘫痪、感觉丧失、膀胱功能障碍等一系列的并发症。脊髓损伤的生理病理机制非常复杂，目前尚未完全破解，建立可靠的动物模型可用来积累经验，从而提高和完善脊髓损伤的生理病理知识，降低脊髓损伤患者的发病率和死亡率。 动物的选择 常用的脊髓损伤实验动物有小鼠、大鼠、兔、犬和猪等。 大鼠价格相对低廉，容易获取，且在电生理和脊髓形态上

干货分享 | 宝子们，后台收到大家的诸多留言，有想了解“胃、结直肠癌淋巴结转移模型；对乙酰氨基酚肝损伤模型；高脂模型“等等，小编均已收到，也登记在册，大家不要着急，小编会一一输出干货内容”。今天事情比较多，来不及整理以往的实验案例，今天咱们说说PCR实验中引物的话题吧~ 今天给小伙伴们分享的是PCR引物设计的8大原则，直接上干货，设计引物的时候，我们都需要考虑哪些因素呢？ PCR引物设计的目的是确保PCR反应能够有效、特

什么是RNA提取 细胞中的RNA可以分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物的过程。 RNA提取的使用目的 通过总RNA提取可获得高纯度及高质量的总RNA,可用于实时荧光定量PCR、Northern blot、microRNA检测、芯片分析, DNA文库构建,基因克隆等实验。RNA用于不同的后续实验,其质量要求不尽相同。 cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留; Northern对RNA完整

运动病（motion sickness，MS）是指乘坐运载工具时出现的以头昏、眩晕、恶心、呕吐、面色苍白、出冷汗等一系列前庭和自主神经反应为主要临床表现的疾病。运动病可发生于任何年龄，发病率较高，但其确切的发病机制至今尚不清楚。为探究运动病的病理生理学机制、筛选有效的抗运动病新药，研究者建立了许多模拟人类运动病的试验动物模型。 动物的选择 晕动病动物模型主要有大鼠、小鼠、豚鼠、新西兰家兔。 造模方法 1 颈部手术眩晕模型 颈性眩

运动病（motion sickness，MS）是指乘坐运载工具时出现的以头昏、眩晕、恶心、呕吐、面色苍白、出冷汗等一系列前庭和自主神经反应为主要临床表现的疾病。运动病可发生于任何年龄，发病率较高，但其确切的发病机制至今尚不清楚。为探究运动病的病理生理学机制、筛选有效的抗运动病新药，研究者建立了许多模拟人类运动病的试验动物模型。 动物的选择 晕动病动物模型主要有大鼠、小鼠、豚鼠、新西兰家兔。 造模方法 1 颈部手术眩晕模型 颈性眩

分享贴子

小编十年前也是在实验室摸爬滚打的一名实验员，昨天下午去实验室做了一次Q-PCR实验，自信心满满，认为这是一件小case。 今天早晨，处理实验数据发现，扩增曲线没有跑出来，和同事的数据一比对，小编完败。 小编回想昨天实验过程，开始进行问题分析，是移液枪使用不规范导致液体量取不准确？还是反应体系有问题？还是扩增温度不够？扩增时间不够？。。。 今天借着Q-PCR实验和小编的亲身经验，和大家分享下移液枪的正确使用，尽量避免实验

动物实验中各种不同给药途径的方法步骤分享给大家 一、 尾静脉注射 （1）首先，提取小鼠尾巴，将其放在鼠笼盖或者手背上，并进行适当的安抚； （2）然后，将小鼠装入固定器中，盖紧盖子，并使尾巴朝外露出用酒精棉球擦拭小鼠尾巴或者用热水、浴霸加热，使其血管扩张； （3）将尾巴拉直，使其红色静脉清晰可见； （4）距离鼠尾尖1/3处进针，若进针畅通无阻，则说明针头在血管内； （5）检查针管内有无回血，如有，则可以注射； （6）用棉

抛开剂量谈毒性-耍流氓 抛开成功率谈合作-大忽悠 高质量科技核心，临床论著，正常周期安排，超高性价比，私人订制，无需客户妥协方向。

医学统计源科技核心，临床论著 医学中文北大核心， 基础论著 正常周期操作，90%正刊录用率

只做精品，宁缺毋滥 临床论著，无所不能 期刊名称:《中国优生与遗传杂志》 级别：统计源科技核心

行业痛点:1.价格贵2.周期慢3.成功率低 鱼和熊掌不可兼得，我认为的最优方案应该是:成功率保障的是前提条件下，客户需明确价格与周期的优先级。价格优先级高，就选直投正常稿，价格低。（这个是我这边的模式）周期优先级高，就选关系加急稿，周期快。

在 Western Blot 实验中，内参是指用于标准化蛋白质表达水平的参照蛋白。内参通常是一种在细胞中普遍表达且表达水平相对稳定的蛋白质，其表达水平不受实验条件或处理的影响。我们跑Western blot除了想知道目的蛋白在细胞/组织中是否表达，更重要的是想知道表达量的高低。Western blot条带的灰度值能够帮我们判断目的蛋白的表达丰度，但前提是你最初的上样量是一样的，这个上样量指的可不是上样体积，而是你的蛋白浓度。所以我们需要内参来帮我们

因为实验室自己买的医学耗材被某个混蛋顺手牵羊了，东西不贵，但是官网没货了！（气死！）现在实验急需，请问谁能交易一下！二手的都行！

在分子生物学领域，双荧光素酶实验因其高度敏感和操作简便的特性，成为了研究基因表达的重要工具。本文将深入探讨该技术的原理，并通过具体实例阐释其在各领域中的应用。 一、双荧光素酶实验原理 双荧光素酶实验的核心在于利用荧光素酶（Luciferase）催化荧光素产生发光现象，通过测量发光强度来监测目标基因的表达水平。该系统包含两种不同的荧光素酶：火萤酶（Luciferase）和海藻酸酯酶（Renilla）。这两种荧光素酶都需要ATP作为底物，但它

在生命科学和医学基础研究中，或多或少都需要用到抗体。抗体的应用场景不同、标记物众多，且针对同一标记物市场上往往有多个抗体可供选择，那么，我们如何从成百万上千万种抗体中，挑选出我们想要的那支呢? 因此，我们将推荐6个查找抗体的网站，帮大家解决找抗体难的问题! 01、Biocompare Biocompare(http://www.biocompare.com)不仅提供专门的生物试剂搜索工具，还有文章、产品评论、网络研讨会、视频和技术聚焦等资源，有兴趣的小伙伴可以从主页上

4月25日，佛山市人民政府代表团吴越彦、杨帅男莅临MDL，展开了一场旨在促进经济合作与招商的重要访问。此次访问的核心目标是探讨MDL将其业务版图扩展至佛山市的可能性。 访问期间，吴越彦首先代表佛山市人民政府对MDL在医学技术服务领域和子公司优乐动保在细胞药物研发领域的影响力表达了高度赞赏，并详细介绍了佛山市作为粤港澳大湾区核心城市之一的独特优势。他强调，佛山不仅拥有深厚的制造业基础和优良的营商环境，还积极响应国家

大家好，今天聊下做的aPCR数据可以进行分析，能不能用这个问题，判断 qPCR 数据是否可用需要考虑以下几个方面： 扩增曲线：扩增曲线应该呈现出典型的 S 型曲线，且曲线应该平滑，没有明显的锯齿状或平台期。 阈值线：阈值(threshold)一般是基线的标准偏差的10倍。阈值线应该位于扩增曲线的指数增长期，且应该在曲线的中部，不应过高或过低。 CT 值：CT 值(循环阈值)是指扩增曲线达到阈值线所需的循环数。CT 值应该在合理的范围内，一般来说，CT

1、蛋白样品不能反复冻融； 2、蛋白样品应加蛋白酶抑制剂，以增加蛋白的稳定性（建议最好能多加几中种蛋白酶抑制剂）； 3、细胞水平要做Western Blot，一般地5×106个细胞提取的蛋白够就足Western Blot； 4、如果目标蛋白是膜蛋白和胞浆蛋白，所用的去垢剂就要温和得多，建议提取后最好加上NaF去抑制磷酸化酶的活性； 5、若转膜不完全，可以加大上样量，还有转移时你可以用降低电流延长时间，转膜液中甲醇的比例多加5－10％； 6、如果上样量超载，

研究背景 核糖体生成是一个复杂的过程，包括rRNA转录、rRNA剪切、rRNA修饰、核糖体组装和前核糖体的输出，涉及三种RNA聚合酶、大约80种核糖体蛋白和大约200种非核糖体转录作用因子。核糖体生成在细胞核仁开始，在细胞质中结束。核仁的大小和密度会根据蛋白质合成的需求发生变化，而核仁纤维蛋白的表达和RNA聚合酶I的丰度通常用于反映核糖体生物合成的活性。 在癌细胞中，参与核糖体生成的基因经常会发生突变，增加的癌变风险。越来越多的证

01 什么是血清？ 血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后，分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。血清的主要作用是提供基本营养物质，包括激素、维生素、转运蛋白、微量元素、扩散因子和生长因子等细胞增殖和维持的必需成分，促进细胞生长。 02 血清的有什么作用？ 血清的成分十分复杂，既有协助物质运输的蛋白、营养物质，还有促进细胞生长的激素和因子等，正因为血清这种天然成分的复杂性，使

一、大、小鼠割（剪）尾采血 当取血量较少时采用本法。采血前将鼠尾部浸在50℃左右温水中数分钟或用大功率灯泡照射数分钟，麻醉动物，使尾部血管充盈。用75%酒精擦拭鼠尾，用锋利的刀片在尾部作一横切口，割破尾静脉或动脉，让血液自由滴入盛器或用毛细吸管吸取，采血结束，伤口消毒并压迫止血。若多次取血，最好从鼠尾末端开始。小鼠每次可取血0.1ml左右，大鼠每次可取血0.3～0.5ml。若只需要几微升血量，可用锐器（刀或剪刀）垂直割去

载体 在Cohen和Boyer的实验中，两种质粒都能在E. coli中复制。因此，这两种质粒都可以作为载体，使重组DNA得以复制。所有基因克隆实验都需要这样的载体，我们称之为载体（Vector），但典型的基因克隆实验只涉及一个载体，以及一个依赖于载体进行复制的外源DNA片段。外源DNA没有复制起点，即DNA复制开始的地方，因此除非将其放入具有复制起点的载体中，否则它无法复制。自20世纪70年代中期以来，已经开发了许多载体；这些载体分为两大类：质粒（pl

在Western Blot过程中，分子量Marker就像个标尺，可以帮助我们确定目标蛋白的分子量大小，判断蛋白是否成功分离，以及评估转移效率等。通过与蛋白 Marker 的迁移率进行比较，我们可以判断待测蛋白质的分子量范围，并评估电泳结果的准确性和可靠性。 此外，了解蛋白 Marker 的特点和使用方法对于实验的成功至关重要。选择合适的蛋白 Marker、正确使用和解读结果都需要一定的知识和经验。 蛋白Marker的分类 总体来说，目前最常用的蛋白Marker分为非预染

免疫荧光染色是实验室常用的技术之一，但在操作过程中，有许多需要注意的细节，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。本文将为您介绍免疫荧光染色的注意事项，并附上零失误封片技巧。 1. 抗体选择：选择针对您研究的目标蛋白特异性高、亲和力强的抗体，一抗的浓度需要预实验摸索。一抗浓度过高(本身荧光实验，一抗的浓度就较高)，也是造成自发荧光强的重要原因。 2. 抗体稀释：根据抗体说明书建议，使用合适的稀释液和稀释比例进行

心肌缺血再灌注模型构建 随着我国老龄化社会的形成，心脑血管疾患逐渐成为严重影响人们生命健康的最主要疾病。心肌缺血将导致心肌细胞不可逆性坏死，被称为心肌梗死。作为终末分化细胞，大面积心肌细胞梗死将导致严重心脏功能不全危及患者生命及时恢复缺血心肌组织的血液灌注一“再灌注”是治疗急性心肌梗死唯一有效的方法。然而，当缺血心肌再次获得血液灌注后将导致比同时间单纯缺血更加严重的心肌损害，这一矛盾的现象被称为再

菌种活化就是将保藏状态的菌种 放入适宜的培养基中培养 逐级扩大培养得到纯而壮的培养物 即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物 菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。 01、一般菌种临时存放及活化 1.低温保存管应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。 2.准备 37℃之 70﹪酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代

脾细胞是ELISpot和FluoroSpot测定中使用最多的细胞，至少对小鼠和大鼠样本而言是如此。脾细胞可以很容易地从脾脏中分离出来，而不需要Ficoll分离。细胞可以在分离后直接使用，也可以冷冻保存，并在以后批量使用。 下面是编译自https://www.mabtech.com/knowledge-hub/isolation-freezing-and-tha的关于如何最好地（i）分离、（ii）冻存和（iii）复苏脾细胞的详细指南。 脾细胞的分离 材料 细胞过滤器，70µm尼龙，无菌 无菌剪刀和镊子或镊子 无菌培养皿 巴氏移液管，无

本期小助手帮大家详解一个细胞实验，从鼠的脂肪细胞中分离巨噬细胞的实验，步骤多、操作繁琐，但别急，跟着小助手一步一步来做，话不多说，上干货。 实验步骤 01 分离•用PBS清洗脂肪组织，并将组织放在冰上的培养皿中，用剪刀将组织切成小块（约3-5mm）。•将切碎的组织转移到含有7ml冰冷消化缓冲液的10ml圆底管中，此操作需一直保持在冰上。对于>1g的脂肪，将组织切碎并转移到含有10ml冰冷消化缓冲液的50ml锥形管中。•加入1ml（如脂肪组

比格犬(Beagle)又称米格鲁猎犬，原产英国，是国际通用的纯品种犬之一。目前，比格犬是国际公认的实验用犬，它具有体型小、性格温顺、反应均一、重复性好、大脑发达和适应性强等优点，被广泛应用于生物学和医学研究中，尤其是在药物非临床研究中是不可替代的实验动物。 一、科研实验和临床前研究对Beagle犬的年龄要求 年龄选择的标准：实验动物主要器官的重量、脏器系数及形态测量值是了解其健康状况的主要依据，也是慢性毒性实验指定的

一、原理： Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂含有WST-8，它在电子载体（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。 CCK-8法因其高灵敏度，无放射性的比色检测法的优点，可替代传统的MTT法。 二、检测步骤： 向96孔的各孔中加入100μl细胞悬液。 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。 在37

目的和原理 尽管胃不是药物的主要吸收场所，还是有某些由胃粘膜吸收的报道，用大鼠胃瘘技术直接测定胃的药物吸收。 操作步骤 雄性 wistar大鼠，体重220~300g，50mg/kg戊巴比妥i.p.麻醉，颈静脉插管，用以给予肝素化盐水(3000IU/kg)和实验过程中替换全血。实验前立即从肝素化供血大鼠采集替换血。在颈动脉作另一插管，用以收集循环血液样品。上腹部正中切口，注意结扎止血，用丝线结扎右侧胃网膜动静脉分支，然后用丝线结扎胃和左肝小叶后韧带，

按照现在的学制，硕士生一般两年半到三年毕业，博士生一般三到四年毕业。国外高校一般是一年完成硕士、后面三到四年完成博士，与我国硕博连读完成攻博时间相当。但是仍有一半以上博士生无法如期毕业。拖至五六年才能毕业的学生占相当比例，学生本人很着急，导师也很心焦。 现在博士生的毕业要求因不同高校、不同学科和不同导师而异，以前基本是研究成果要在特定档次的期刊上发表几篇论文，现在常采用“积分制”计量博士生的研究产

在学习过程中，我们经常会遇到各种PCR字眼，什么qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR，你了解PCR这个大家族吗？还在傻傻分不清吗？ 一、什么是PCR？ PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的简称，是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。PCR技术自问世以来，在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用，是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新，PCR技术已经发展了三代：普通PCR技术、实时

由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。 因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。 1 必须满足抗体选择的基本条件 流式抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。 2 注意荧光标记方式 流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在