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    组学发现:作者通过RNA-seq技术,检测沉默circRNA的PANC-1/GEM耐药株细胞与对照细胞,发现739个差异基因, 包括520个上调基因和219个下调基因。这些差异基因在多种DNA损伤修复通路中富集,包括碱基切除修复、错配修复和核苷酸切除修复。在这些通路中,包含显著下调的共同基因LIG1。LIG1是DNA连接酶家族的成员,在几乎所有DNA损伤修复通路中发挥着重要作用。 应答检测:在GEM抵抗的PDAC组织中,LIG1也高度表达,并且与PDAC组织中的circRNA表达呈正相关。沉默c
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    小麦胚芽凝集素(WGA)概述 小麦胚芽凝集素(WGA)是一种植物源性的凝集素,主要从小麦胚芽中提取到,是目前研究最多且最有用的凝集素之一. 小麦胚芽凝集素(WGA)适用范围 用于标记哺乳动物细胞、革兰氏阳性细菌、酵母细胞纤维化瘢痕组织的细胞膜,从而进行荧光成像和分析。也可用于免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)和流式细胞术(FC)。 小麦胚芽凝集素(WGA)优点 1.高信噪比 2.荧光强度高 3.不受膜电位控制 4.适用于活细胞和固定细胞 5.对 N-乙
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    酪胺染料的标记,可能会遇到的问题: 1.非特异性染色:酪胺染料在被HRP催化后,氧化的酪胺具有高度反应性,可能与样本中多个位置的蛋白质发生共价结合,导致背景信号增加。 建议:优化过氧化氢和酪胺的浓度,能减少非特异性染色。降低酶反应时间也有助于减少背景信号。这些都需要客户根据自己的实验进行调整,我们无法给他们一个确定的浓度去尝试。因为不同的实验,环境,操作,都会出现不同的结果。 2.过度放大导致的信号溢出:TSA是
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    巴斯德发明的狂犬病疫苗就是脱敏疗法 作者:韩少坤 脱敏疗法:在临床上确定过敏性疾病患者的变应原后,将该变应原制成变应原提取液,并配制成各种不同浓度的制剂,经反复注射或通过其它给药途径与患者反复接触,剂量由小到大,浓度由低到高,从而提高患者对该种变应原的耐受性,当再次接触此种变应原时,不再产生过敏现象或过敏现象得以减轻。  一,1885年巴斯德的原创发明:   经过多次试验,巴斯德创造性地发明了活体培养法制取
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    铁死亡是由膜磷脂上的多不饱和脂肪酸部分过度过氧化引起的。常见的铁死亡反应由GPX4依赖和非GPX4依赖两种方式调节,前者主要有三种磷脂(磷脂酰乙醇胺[PE]、磷脂酰丝氨酸[PS]和磷脂酰肌醇[PI])参与铁死亡。PHLDA2是一种对磷脂具有高亲和力的膜相关蛋白,ALOX12能够通过其脂氧合酶活性特异性氧化游离的多不饱和脂肪酸。那么,不依赖GPX4的PHLDA2是如何启动铁死亡的? 第一步,PHLDA2能够将ALOX12募集到特定的磷脂上 研究PHLDA2与不同类型磷脂的结合亲和
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    一、百萤 pH荧光探针Protonex 红600参数 Ex(nm) 576 Em(nm) 597 分子量 698.94 溶 剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存,避光防潮 二、百萤 pH荧光探针Protonex 红600概述 Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同,酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性,Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室(如内体和溶酶体)提供了强大的工具。Protonex Red染料
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    第一步,PHLDA2与ALOX12功能相关性 建立ALOX12-tet-on细胞。ALOX12促进了细胞铁死亡,在失去PHLDA2后,ALOX12诱导的铁死亡水平显著降低(图1e),脂质过氧化水平也被消除(图1f)。表明ALOX12介导的脂质过氧化和铁死亡依赖于PHLDA2的表达。 第二步,PHLDA2与ALOX12的互作是诱导铁死亡所必需的 另外,PHLDA2缺失后,野生型(WT) PHLDA2的表达恢复了铁死亡应答,而单独重新表达与ALOX12结合的PHLDA2-PH亦足以恢复铁死亡反应,PHLDA2-ΔPH则不能(图1g)。在人类肿瘤标本COSMIC数
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    第一步,确定与下游蛋白分子的互作关系 进行内源Co-IP实验和GST pulldown实验,发现USP8与GPX4互作(图1a-c)。 第二步,USP8与GPX4蛋白结合的具体位置 为了探索USP8与GPX4蛋白结合的位置,针对USP8构建不同的突变体分别进行Co-IP实验,发现USP8通过 aa1-313、aa715-1118区域与GPX4结合(图1d-e)。 第三步,USP8如何影响GPX4蛋白的稳定性 USP8是一个去泛素化酶。Co-IP分析发现,USP8能降低GPX4的泛素化水平,而酶非活性突变体USP8-c786a则不能去除GPX4的泛素链,表明USP8通过其
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    第一步,AARS1分别乳酸化YAP和TEADK90和K108位点 乳酸化蛋白质组学KEGG分析富集多种通路,重点集中在Hippo信号通路上,YAP和TEAD1分别在K90和K108位点发生了乳酸化(图1a-b)。IP-WB检测也显示YAP-TEAD发生乳酸化(图1c)。此外,构建YAP K90R和TEAD1 K108R突变体进行IP-WB检测显示没有发生乳酸化(图1d)。另外,葡萄糖剥夺降低YAP-TEAD1的乳酸化水平,而乳酸处理明显恢复其的乳酸化水平(图1e-f)。 第二步,AARS1与YAP-TEAD1相互作用 Co-IP实验发现AARS1与YAP-TEAD1互作(图1g
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    第一步,探讨PRMT1在肝细胞癌中上调的机制 已有结果显示,PRMT1的蛋白水平在HCC中上调,但PRMT1 mRNA水平没有变化。推测泛素-蛋白酶体降解可能参与PRMT1的上调。用两种不同的蛋白酶体抑制剂处理细胞,发现PRMT1蛋白水平呈剂量依赖性增加(图1a),表明PRMT1的蛋白水平可以通过泛素介导的降解来调节。 第二步,确定PRMT1降解的关键泛素连接酶 根据设计的筛选策略,E3泛素连接酶FBXO7为候选互作蛋白(图1b-c)。IP-MS分析显示FBXO7是前10个与PRMT1相互作用的候
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    IP去泛素化类型检测实验发现,LKB1的泛素化修饰主要发生在K6链泛素化,而不是传统的K48和K63位点(图1e-h)。 更多详细内容分享可查阅:【国刊之光《STTT》(IF=39):基于去泛素酶的药靶开发转化。JOSD2解除LKB1复合体活性促进肺癌发生】 。 如您有泛素相关机制研究,欢迎留言探讨。
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    一、百萤活性氧Cell Meter线粒体羟基自由基检测试剂盒简介 细胞内羟基自由基的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基(HO·)是与其他分子高度反应的活性氧(ROS)之一,以实现稳定性。通常,羟基被认为是氧化代谢的有害副产物,其可以在生命系统中引起分子损伤。它显示平均寿命为10-9秒,可以与几乎所有生物分子如核DNA,线粒体DNA,蛋白质和膜脂质发生反应。 MitoROS OH580是活细胞渗透探针,可以快速和选
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    1.什么是DiI?它的用途是什么? 答:DiI即DiIC18(3)是常见的细胞膜荧光探针之一,全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine 。呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光。它的家族还有DiR、DiO、DiA、DiS、DiD。 2.如何区别DiI探针中的C12、C16、C18? 答:从水溶性
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    糖尿病肾病(DKD)是一种普遍存在的慢性肾脏疾病,是终末期肾病进展的主要原因。足细胞是覆盖GBM外表面的高度分化的上皮细胞,对于维持GBM的完整性至关重要。因此,足细胞损伤的程度通常用来评估DKD的进展。此外,足细胞中的炎症积聚与足细胞损伤的加重密切相关。 2024年6月,温州医科大学梁广团队在Nat Commun(IF=14.7)上,发表“Podocyte OTUD5 alleviates diabetic kidney disease through deubiquitinating TAK1 and reducing podocyte inflammation and injury”的研究成果。揭示
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    AARS1作为一种蛋白质乳酸转移酶,使用乳酸作为直接的乳酸供体 第一步,AARS1与乳酸存在结合 分子对接预测乳酸可以很容易地结合到AARS1的催化口袋上(图1a)。等温滴定量热法验证了该结果(图1b)。 第二步,确定AARS1是一种乳酸转移酶 体外乳酸化实验,显示AARS1能够以依赖于乳酸和ATP的方式直接使组蛋白H3和H4乳酸化(图1c);质谱分析,显示AARS1能直接在K18处乳酸化H3肽(图1d)。AARS1催化袋内氨基酸残基突变体(5M)消除了其乳酸转移酶活性(图1c-d
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    简牍:疾病靶点泛素修饰调控机制研究思路。 Step1:根据临床需求和文献,凝练临床科学问题。 Step2:根据临床科学问题,确定泛素修饰靶点。 Step3:明确修饰靶点的细胞动物模型功能 Step4:解析泛素修饰酶,修饰类型和位点、以及下游机制分子调控方式等。该研究为病理提供新视角、为诊疗提 供新策略。 正文: 互作机制研究是临床基础研究的难点,修饰互作机制研究是互作机制研究上的明珠。泛素化修饰机制研究,主要目标是深入理解泛素化过程
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    UBE2C促进SNAT2的单泛素修饰,抑制其多泛素修饰。 检测步骤: 第一步,筛选UBE2C蛋白底物SNAT2 IP-MS和泛素蛋白质组学检测发现:SNAT2是UBE2C泛素修饰的底物(图1a)。 第二步,UBE2C与SNAT2相互作用 Co-IP等实验检测证实UBE2C与SNAT2相互作用(图1 b-c)。 第三步,发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化,阻断K63连接的泛素链的延伸 Co-IP分析显示发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化,但阻断了泛素链的延伸(图1 d-e)。分别构建不同泛素突变体Ub-WT,K6R,K11R,K 27R, K29R, K33R,K48R,K63R(基
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    1.百萤活性氧(ROS)概述 活性氧(ROS)是具有化学活性的含氧分子,是作为细胞代谢的副产品自然产生的。在生理条件下,ROS水平受到仔细调节,它们在正常细胞信号转导、细胞周期、基因表达和体内平衡中充当信使。 当过量产生时,ROS有可能导致许多有害事件。在高浓度下,ROS会在细胞中诱导氧化应激,从而导致细胞大分子(如核酸、膜脂和细胞蛋白质)的后续损伤。这些生物分子的氧化损伤可引发细胞凋亡,与衰老有关,并与多种疾病、癌症和神经退
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    一、百萤 活性氧ROS Brite HPF简介 活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加
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    三阴性乳腺癌(TNBC)是乳腺癌中最恶性的亚型。TP53突变是肿瘤常见的抑癌转促癌突变。在TNBC患者中,TP53突变率高达80%,其突变会导致化疗耐药或免疫治疗效果差等临床问题。因此,迫切需要阐明分子机制并确定TNBC进展的新靶点。 2024年7月,山东大学杨其峰团队在Adv Sci(IF=14.3)上,发表“CircCFL1 Promotes TNBC Stemness and Immunoescape via Deacetylation-Mediated c-Myc Deubiquitylation to Facilitate Mutant TP53 Transcription”的研究成果,提示了TNBC中突变TP53调控的新机制,并为TNB
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    1.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针参数 Ex -- Em -- 分子量 N/A 溶剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存,避光防潮 2.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针介绍 SO Green 520WS 单线态氧探针被开发为水溶性荧光探针,用于检测细胞外单线态氧,因为它不渗透细胞。它对单线态氧具有高度选择性。与其他可用的荧光和化学发光单线态氧检测试剂不同,SO Green 520WS 单线态氧探针不会对羟自由基、超氧化物或其他活性氧 (ROS) 显示任何明显的响应。该指示剂仅呈现微弱的蓝色荧光。
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    鼻咽癌(NPC)是一种影响头颈部的癌症。目前,化疗是局部晚期鼻咽癌(LA-NPC)患者的标准方案。然而,约10%的鼻咽癌患者出现化疗耐药,导致预后不理想。因此,阐明化疗耐药的分子机制至关重要。 2024年7月,中山大学唐玲珑和赵银团队在Adv Sci(IF=14.3)上,发表“DCAF7 Acts as A Scaffold to Recruit USP10 for G3BP1 Deubiquitylation and Facilitates Chemoresistance and Metastasis in Nasopharyngeal Carcinoma”的研究成果,发现DCAF7在体外和体内促进鼻咽癌细胞的顺铂耐药和转移。 图
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    乳酸丰富是肿瘤的结果,肿瘤即使在含氧量正常的情况下,也会利用糖酵解作为能量代谢的主要来源,这种Warburg效应,促使肿瘤细胞具有丰富的乳酸代谢特征。存在即合理,肿瘤乳酸的促癌机制,是肿瘤靶点开发的重要内容。 2024年3月,同济大学、复旦大学及安徽科技大学等多单位合作在J Clin Invest(IF=13.3)上,发表“The alanyl-tRNA synthetase AARS1 moonlights as a lactyltransferase to promote YAP signaling in gastric cancer”的研究成果,研究发现tRNA合成酶丙氨酰-tRNA合成
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    样品制备、电泳、转膜、封闭、一抗、二抗、显色 一、蛋白准备(样品制备) (一)总蛋白提取(弱的RIPA裂解液或WB裂解液)1.方法一(胰酶消化):去除细胞上清培养基,PBS清洗1-2次,加入适量胰酶消化,放置37℃,5%CO2培养箱中(不同细胞消化时间不同),消化完全,2倍于胰酶体积的完全培养基终止反应,吹散混匀,吸入至15 mL 离心管,1000-1500 rpm,离心3-5 min。 2.方法二(用细胞刮将细胞刮下):留1-2 mL细胞上清培养基,将培养皿放置冰上用细胞刮
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    一、百萤 Annexin V-Cy5标记简介和工作原理 细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细
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    百萤 Annexin V-AF488标记参数: Ex(nm):499 E m(nm):520 分子 量:~36000 溶 剂:Water 存储条件:在零下15度以下保存,避免光照 百萤 Annexin V-AF488适用仪器 (1)流式细胞仪 激发:488nm激光 发射:530/30nm滤波片 通道:FITC通道 (2)荧光显微镜 推荐孔板:黑色透明 通 道:Pacific Blue通道 百萤 Annexin V-AF488实验方案 概述 用测试化合物(200μL/样品)制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵
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    一、百萤 Annexin V-Cy3标记概述: Annexin V-Cy3标记是用于检测细胞功能的探针,膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物,属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸(PS),其通常保持在细胞膜的内叶(细胞质侧)。 在细胞凋亡中,PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示,并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的
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    注1:整个缀合过程可以在 一天内完成。但是,缀合前对APC 的纯化可能需要24-48小时。除了下面 列出的材料外,您还需要浓度至少为2mg/ml的抗体溶液。请您在进行APC抗体缀合实验之前熟悉 如何使用脱盐柱以及如何获取吸光度光谱。 注 2 : SMCC-APC缀合物非常稳定(在“交换缓冲液”中,在4℃下至少可以稳定几个月)。因此, 如果您需要节省一部分时间,可以选择同时缀合10毫克或更多的 APC,并将其用于几次抗体实验(在几周内)。 一 .APC的制备 1. 将APC纯化。缀
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    铁死亡是一种由大量脂质过氧化物积累所驱动的调节性细胞死亡方式,与肿瘤发病密切相关,其调控机制尚不清楚。因此,深入理解肿瘤细胞抵抗铁死亡的分子机制,将为肿瘤治疗提供新策略。 2024年4月,武汉大学医学研究院、教育部免疫与代谢前沿科学中心、中南医院以及泰康生命医学中心团队在PNAS杂志上,发表“USP8-governed GPX4 homeostasis orchestrates ferroptosis and cancer immunotherapy”的研究成果。该研究揭示了USP8通过稳定谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)来抵
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    分析方案 概述 用测试化合物(200μL/样品)制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞: 1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液:10mM HEPES,140mM NaCl和2.5mM CaCl2,pH 7.4。 1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。 1.3离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。 1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中(来自步骤1.1)。 1.5在
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    1.膜联蛋白结合缓冲液(10X)简介和工作原理 膜联蛋白 V 结合缓冲液 * 10X 优化用于成像和流式细胞术* 是一种等渗缓冲液,用于促进使用膜联蛋白 V 偶联物标记凋亡细胞。 该缓冲液的 pH 值为 7.4,含有浓度的钙,可促进膜联蛋白 V 与凋亡细胞表面暴露的磷脂酰丝氨酸残基结合。 膜联蛋白 V 结合缓冲液 *10X 优化用于成像和流式细胞术* 以 10X 浓缩液形式提供。 在膜联蛋白 V 染色之前,我们建议使用蒸馏水将 10X 浓缩液稀释为 1X 工作溶液。 实验后,丢弃
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    基于HuProt蛋白组芯片筛选目的蛋白的互作蛋白技术服务蛋白组芯片是一种蛋白组通量的蛋白芯片工具,可以对目标样本进行蛋白组通量水平的结合蛋白谱检测和评价。HuProtTM v4.0蛋白芯片是目前世界上包含大蛋白库的蛋白组芯片产品。HuProtTM v4.0蛋白芯片包含>21000个蛋白,覆盖人蛋白组81%的蛋白。样本中的蛋白与蛋白芯片上的蛋白通过特异性结合作用,从而识别目的蛋白的互作蛋白特征谱,用于研究蛋白的相互作用网络,揭示生命活动的复杂机制。 蛋
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    请设计免疫学检测技术区分猴痘病毒的疫苗免疫与病毒感染. 有哪位大佬能提供标准答案,虽然会但是会得不完整,急需专业人士
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    RIP实验详细操作方法: 一、细胞裂解(对于单层细胞或贴壁细胞) 1.用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。 2.加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞,然后转移到离心管。 3.通过在4℃下以1500 rpm离心5分钟来收集细胞,并丢弃上清液。 4.在等体积的完全RIP裂解缓冲液中重新悬浮细胞颗粒。通过上下移液混合,直到细胞被分散,混合物呈现均匀。将裂解液放在冰上孵育5 min。这一步允许低渗RIP缓冲液膨胀细胞。将每个裂解液的~200 μL分
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    肝细胞癌(HCC)是原发性肝癌最常见的类型。HCC 的肿瘤干细胞(CSCs)是引发肝癌病变异质性和促进肿瘤复发、转移、治疗耐药的重要原因。因此,了解 CSCs 发生和发展的调控机制将为改善 HCC 患者预后提供机会。 2023年9月,中国医学科学院/北京协和医学院与同济大学团队合作在Nat Commun杂志上,发表“SCARB2 drives hepatocellular carcinoma tumor initiating cells via enhanced MYC transcriptional activity”的研究成果。该研究揭示SCARB2作为HCC的调节剂和潜在治疗靶点。 图形摘
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    Annexin V是一种高效的蛋白质,广泛应用于细胞生物学研究。它具有高亲和力,能够特异性地结合到外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)上,这一现象在细胞凋亡早期阶段尤为明显。因此,Annexin V已成为检测细胞凋亡的标准工具。 荧光标记的Annexin V更是如虎添翼,通过与不同颜色的荧光染料结合,研究人员可以在流式细胞术和荧光显微镜等技术中,轻松、高效地检测和分析细胞凋亡。 Annexin V主要优点包括: 1. 高灵敏度和特异性:荧光标记的Annexin V能够准确识别
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    一、百萤iFluor 560-dUTP*1mM TE 缓冲液(pH 7.5)*参数 Ex(nm) 560 Em(nm) 571 分子量 N/A 溶 剂 Water 存储条件 在-15℃以下保存,避光防潮 外观 液体 二、百萤iFluor 560-dUTP*1mM TE 缓冲液(pH 7.5)*概述 iFluor 560-dUTP 是一种 iFluor 560 修饰的核苷酸,可用于各种分子生物学应用,例如 DNA 分子的标记和检测。它包含通过连接臂连接到脱氧尿苷三磷酸 (dUTP) 分子的 iFluor 560 染料。当在合成过程中掺入 DNA 时,iFluor 560-dUTP 可以使用荧光显微镜或其他基于荧光的测定法进行可视化。它常
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    生物复合物准确模型的建立对于细胞功能解析与药物设计至关重要。alphaFold 3(AF3)的出现改变了这一局面,它能够预测包括蛋白质、DNA、RNA、配体小分子、离子和修饰残基在内的复合物的联合结构。AF3的高精度预测能力将为我们更深入地理解细胞功能、合理设计治疗药物以及推动生物科学的发展提供有力的支持。 一、模型预测性能1.蛋白-小分子配体结构预测准确性更高AF3还比各种单一任务模型表现出更高的性能(图1a),包括蛋白-小分子、核酸、共价、
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    注射狂犬病免疫球蛋白,有什么意义? 作者:韩少坤 狂犬病免疫球蛋白是高效价的狂犬病病毒抗体,能特异性的综合狂犬病病毒,起到被动免疫的作用。这是传统教科书的标准说法。 1,狂犬病免疫球蛋白,于受伤部位作皮下浸润注射。狗咬与注射免疫球蛋白之间有个时间差,当注射的狂犬病免疫球蛋白,浸润进入组织时,在这个时间差内,病毒早已粘上细胞,并感染躲进人体细胞了。 2,且肌注的狂犬病免疫球蛋白,无法透过皮肤屏障而顺畅到达靶
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    1. 百萤iFluor 488-dUTP* 1mM的Tris缓冲液(pH7.5)*的应用 染料修饰的脱氧尿苷5'-三磷酸酯是通过常规酶掺入方法(例如反转录,缺口翻译,随机引物标记或PCR)生产染料标记DNA的常用方法之一。 这种酶促荧光标记方法广泛用于FISH探针和基于微阵列的实验。 该iFluor 488-dUTP缀合物与SpectrumGreen 滤光片组合一起用作绿色荧光(SpectrumGreen 是Vysis的商标)。 与常用的绿色探针(例如Fluorescein-12-dUTP)相比,iFluor 488提供了更明亮的信号,具有很高的光稳定性,并且
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    CoIP-Mass和CoIP-WB应用场景: CoIP-Mass:用于构建目的蛋白的蛋白互作组数据,或用于不同遗传背景/实验条件下的互作组差异。 CoIP-WB:用于验证目的蛋白和候选蛋白的相互作用关系,或用于不同遗传背景/实验条件下的互作变化。 CoIP-Mass是一种检测细胞内蛋白/蛋白互作组的高通量技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和质谱检测技术对目的蛋白在特定细胞/组织内的互作蛋白,进行系统的检测和分析。该技术适用于目的蛋白在特定细胞/组织中的蛋白互作
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    一.碘化丙啶简介 碘化丙啶(Propidium iodide)是一个小分子芳香化合物,通常在研究和开发中作为荧光核酸结合染料。PI通常用于区分活细胞与凋亡细胞和坏死细胞,因为它可以自由渗透死亡或损伤细胞膜,而不能进入正常活细胞。碘化丙啶能染色核酸,如DNA和RNA,因此可用作流式细胞仪、原位杂交和免疫组织化学应用中细胞膜完整性的指示剂。 在样品中加入碘化丙啶后,细胞膜可逆性损伤的细胞将发出红色荧光。通过这种方式,碘化丙啶能够快速且可
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    免疫学大佬们能不能帮忙看看我的化验单,只是igg4肾功能减退吗?能不能排除多发性骨髓瘤
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    免疫耐受和变态反应,是疾病的表现形式吗? (文/韩少坤) 免疫耐受和变态炎症反应,生命中的对立统一事件,疾病的临床表现皆是变态反应所致,临床表现程度与免疫耐受成反相关之关系。 99%医生对免疫耐受和变态反应,只知道名称,不知道内涵。而几乎所有内科疾病都是变态反应所致。
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    荧光素标记的抗抗体是酶标二抗吗 有没有大佬
    哦明67 3-19
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    简介: 两个大分子间的共价结合,比如抗体与酶或者酶与DNA,是研究人员一项重要的任务。有几种方法可用于交联两种生物大分子。常用的一种方法是使用小型交连剂(如磺化-SMCC)。SMCC的一端有一个胺反应性NHS酯基团,可与蛋白质上的自由胺(-NH2)发生反应;另一端有一个硫基反应性的马来酰基团,可与待连接生物大分子上的硫基(-SH)发生反应。由于蛋白质通常包含自由胺和硫基两种官能团,SMCC修饰的连接剂极不稳定且容易自反应,导致大量同型交联反应。此外,
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    发生了三型变态反应之后体内循环免疫复合物怎么清除?寻求帮助解答。
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    一.百萤 链霉亲和素-Xtra IF488缀合物概述 链霉亲和素缀合物广泛用于和生物素缀合物结合以检测多种生物靶标,例如蛋白质,核酸和其他分子。它们被用作许多生物检测的理想选择,例如免疫荧光显微镜,流式细胞术,蛋白质印迹和其他生物应用,因为链霉亲和素具有很强的亲和力结合生物素,在广泛的pH和温度范围内都不会受到影响。AAT Bioquest®提供多种标记有经典荧光染料的链霉亲和素偶联物(例如:FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®),以及
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    AAT Bioquest提供多种链霉抗生物素蛋白产品,包括使用我们出色的iFluor 和mFluor 染料系列标记的产品。iFluor 和mFluor 染料都经过优化,可用于标记蛋白质,特别是抗体。这些染料是明亮的,光稳定的并且对蛋白质具有小的猝灭。荧光仪器的主要激光线(例如,350,405,488,555和633nm)可以很好地激发它们。iFluor 染料还具有比经典荧光标记染料(如FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®)更好的标记性能。每种iFluor 染料的开发都与特定AlexaFluor®或其他等效荧光标

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