蛋白质腐植酸 这种方法用到如下四种试剂：①试剂 A：20g Na2CO3（ACS 级）溶解于 1L 0.1mol/L 的 NaOH（4g） 中；②试剂 B：首先将 1g（0.1g） 的酒石酸钾钠晶体溶解于 100ml（10ml）蒸馏水中，然后加入0.5g （0.05g）的 CuSO4·5H2O（ACS 级）；③试剂 C：50ml 的试剂 A＋1.0ml 试剂 B ，现配现用（只能放置10min）；④试剂 D：福林酚（Folin）试剂：纯水=1:1（现配现用）；{根据样品数算}* Folin试剂使用前用标准的 NaOH 滴定，以酚酞为指示剂标定其酸度。滴定标准氢氧化钠溶液（ 1mol/L 左右），以酚酞为指示剂，当溶液颜色由红→紫红→紫灰→墨绿时即为滴定终点。 Folin 试剂试剂的酸度应为2mol/L左右，将用时临时之稀释至相当于1mol/L酸度应用。（1mol/L 酸度的 Folin 试剂易变质）⑤标准试剂：称取 0.1g 牛蛋白血清溶于 100ml 蒸馏水中，在其中取出 1ml再定容至 10ml（100mg/L）。蛋白质 0～100mg/l 标准曲线的测定步骤如下：①分别取 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml （0、20、40、60、80、100mg/L）标准试剂于各个比色管中，补水至1ml。②向每个比色管中加入 4ml 的试剂 C，迅速混合(激烈旋转混合25 秒钟)。③将混合液于室温下静置 10min。④加入 0.5ml 试剂 D，快速混合(激烈旋转混合25 秒钟)。⑤静置 30min，此时液体将呈现兰绿色，将比色管中的液体放在 750nm波长下测定吸光度。采用腐殖酸为标准试剂，称腐殖酸 0.1g，0.2g NaOH，溶解并定容至 100ml；在其中取出 1ml 再定容至 10ml。腐殖质标线测量步骤如下：1) 分别取 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml （0、20、40、60、80、100mg/L）标准试剂于各个比色管中，补水至 1ml2)加入 4ml 的试剂 A，迅速混合。3) 将混合液在室温下静置 10min4) 加入 0.5ml 试剂 D，快速混合5) 静置 30min，此时液体将呈现淡蓝色，在 735nm处测定吸光度。样品的测量采用 1ml 的试样，其它步骤同标准曲线的测量（ pellet 层稀释5倍）。计算 EPS 中的蛋白质与腐殖酸，需要将测量得到的吸光度进行修正。设 Atotal 为加入 CuSO4 胞外聚合物样品的吸光度，Ablind为没有加入 CuSO4胞外聚合物样品的吸光度，Aprotein为修正后蛋白质的吸光度，Ahumic为修正后腐殖质的吸光度，则蛋白质和腐殖质吸光度的计算公式如下：Atotal =Aprotein+AhumicAblind=0.2Aprotein+AhumicAprotein=1.25（Atotal- Ablind）Ahumic = Ablind -0.2 Aprotein

请问你现在找到方法了吗?