UBE2C改变SNAT2泛素修饰类型

UBE2C促进SNAT2的单泛素修饰，抑制其多泛素修饰。
检测步骤：
第一步，筛选UBE2C蛋白底物SNAT2
IP-MS和泛素蛋白质组学检测发现：SNAT2是UBE2C泛素修饰的底物（图1a）。
第二步，UBE2C与SNAT2相互作用
Co-IP等实验检测证实UBE2C与SNAT2相互作用（图1 b-c）。
第三步，发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化，阻断K63连接的泛素链的延伸
Co-IP分析显示发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化，但阻断了泛素链的延伸（图1 d-e）。分别构建不同泛素突变体Ub-WT,K6R,K11R,K 27R, K29R, K33R，K48R，K63R(基云有Ub载体套装)，进行Co-IP分析，发现K63R突变显著降低SNAT2的多泛素化水平，表明UBE2C阻断SNAT2的K63类型的泛素化修饰（图1f-g）。
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